儀器介（jiè）紹

實驗目的：

檢測受試物是否引起哺乳動物骨髓細胞染色體畸變（biàn）,以評價受試物致突變的可能性

實驗概述：

染色體是細胞核中具有特（tè）殊（shū）結構（gòu）和遺傳功能的小體,當化學物質作用於細胞周期G1期和S期時（shí）誘發染色（sè）體型畸（jī）變,而（ér）作用於（yú）G2期時則誘發染色單體型畸變。給（gěi）試驗的大、小鼠腹腔注入秋水（shuǐ）仙素抑製細胞（bāo）分裂時紡錘絲的形成,以增加中期（qī）分裂相細胞的比例,並使染色體絲（sī）縮短、分散、輪廓清晰。在顯微鏡下觀（guān）察染色體數目和形態。本方法特別適用於需考慮體內代謝活化後（hòu）的染色（sè）體畸變分析。若有證據表明受試物或其代謝產物不能到達骨髓,則不適用於本（běn）方法，

應用範圍

應用於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可（kě）吸（xī）入顆粒染毒效果研究等各個領（lǐng）域

符合標準：

GB/T 15670.16-2017《農藥登記毒（dú）理學試驗方法第16部分:體內（nèi）哺乳動物骨髓細胞染色體畸（jī）變試驗》

二、試驗流（liú）程（chéng）

1）動物選擇:常用（yòng）齧齒（chǐ）類動物（wù）（大鼠或小鼠），通常每組至（zhì）少5隻/性別。

2）給藥方案:

單次給藥:通常（cháng）在采樣前12-48小時（shí）給藥（覆蓋細胞周期）

多次給藥:若受試物代謝或毒性需重（chóng）複暴露。

3.陽（yáng）性（xìng）對照:已知致畸變劑（如環磷酰胺）

4.陰性對照:溶劑對照（如生理鹽水或DMSO）

5.采樣時間:通常在給藥後24小（xiǎo）時和48小時采集骨髓細胞（覆蓋不（bú）同細胞周期階段）

6.染色體製備:

處死動（dòng）物後取出骨髓細胞。

用秋水仙素（Colchicine）處理，阻斷細胞分裂於中（zhōng）期。低滲處理、固定、製（zhì）片並染色（如Giemsa染色）

7.鏡檢分析:

觀察至少200個中期分裂相/動物，記錄畸變類型（xíng）和頻率，

區分染色體型（xíng）畸變（如雙著絲（sī）粒體）和染色（sè）單體型（xíng）畸變（如斷裂）

三、結果判定

1）劑量相（xiàng）關性:畸（jī）變率隨劑量增加而升（shēng）高（gāo）。

2）統計學差異:試驗組畸變率顯著高於陰（yīn）性對照（zhào）組(如p<0.05)

3）生（shēng）物學意義:需結合曆（lì）史對照（zhào）數據和畸變（biàn）類（lèi）型綜合評估。