儀器介紹

實驗目的（de）：

檢測受試（shì）物是否引起哺乳動物骨髓細胞染（rǎn）色體畸變,以評（píng）價受試物致突變的可能性

實驗概述（shù）：

染色體是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的小體,當化學物質作（zuò）用於細胞周（zhōu）期（qī）G1期和S期時誘（yòu）發染色體型畸變,而作用於G2期時則（zé）誘發染色單體型畸變。給試驗的大、小鼠腹腔注入秋水仙素（sù）抑製細胞分裂時紡錘絲的形成,以增加（jiā）中期分裂相細胞的比例,並使染色體絲縮（suō）短、分散（sàn）、輪廓清晰。在顯微鏡下觀察染色（sè）體數（shù）目和形態。本方法特別適（shì）用（yòng）於需考（kǎo）慮體（tǐ）內代謝活化後的染色（sè）體畸變分析。若有證據表明（míng）受試物或其代謝產物不能到達骨（gǔ）髓,則不適用（yòng）於本方法，

應用範圍（wéi）

應用於科研、農業、衛生、教（jiāo）育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符合標準：

GB/T 15670.16-2017《農藥登記毒理學試驗方法第16部分:體內哺乳（rǔ）動物骨髓細胞染（rǎn）色體畸（jī）變試驗》

二、試驗流程

1動物選擇:常用齧齒類動物大鼠或小鼠，通常每組至少5隻/性別。

2給藥方案:

單次給藥:通常（cháng）在采（cǎi）樣前12-48小時給藥覆蓋細胞周期

多次給藥:若受（shòu）試物代謝或毒性需重複暴露。

3.陽性對照:已知致畸（jī）變劑如環磷酰胺（àn）

4.陰（yīn）性對照:溶（róng）劑對（duì）照如（rú）生理鹽水或DMSO

5.采樣（yàng）時間:通常在給藥後（hòu）24小時和48小時采集骨（gǔ）髓細胞覆蓋不同（tóng）細胞周期階段

6.染色體製備:

處死（sǐ）動物後取出（chū）骨髓細胞。

用秋水仙素Colchicine處理，阻斷細胞分裂（liè）於中期。低滲（shèn）處理、固定、製片並（bìng）染色如Giemsa染色

7.鏡檢分析:

觀察至少200個中期分裂（liè）相/動物，記錄畸變類型和頻率，

區分染（rǎn）色體型畸變如雙著絲粒體和染色（sè）單體（tǐ）型畸變如斷裂

三、結果判定

1劑量相關（guān）性:畸變率（lǜ）隨劑（jì）量增加而升（shēng）高。

2統計學差異:試驗組畸變率顯著高於陰性對照組(如p<0.05)

3生物學意義:需結合曆史對照數據和畸變類型綜合評估。